BCA蛋白定量試劑盒

產品說明：

對于微量或少量的血液樣品，可以在一步中不進行離心棄上清的操作，直接在第二步中加入10倍血液體積的紅細胞裂解液，并在冰上裂解4-5分鐘。對于鼠的血液，裂解4-5分鐘已經足夠，對于人的外周血，宜延長裂解時間至10分鐘，但通常不宜超過15分鐘，并且裂解過程中宜適當偶爾搖動以促進紅細胞裂解。后續步驟相同。蛋白質定量是蛋白質研究的基礎工作之一。BCA(bicinchoninic acid)是理想的蛋白質定量方法;是當前比Lowry 法更優越的專用于檢測總蛋白質含量的產品。該方法以快速靈敏、穩定可靠，對不同種類蛋白質檢測的變異系數非常小而倍受專業人士的青睞。BCA 法測定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的化學物質的影響。在組織細胞裂解實驗中，常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基乙醇）和脂類的影響。實驗中，若發現樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
該產品不受此影響，因此與之配合使用，可免除您實驗中的許多煩惱。該試劑盒在31.25--2000ug/ml濃度范圍內有較好的線性關系。

使用說明：
配制工作液: 根據標準品和樣品數量，按 50 體積 BCA 試劑 A 加 1 體積 BCA 試劑 B（50:1）配
制適量 BCA 工作液，充分混勻。
2、稀釋標準品：將標準品儲存液稀釋至 31.25～2000ug/ml，推薦使用去離子水或 0.9% NaCl。
管號 稀釋液體積 標準品體積 終濃度
A 360ul 240ul(5mg/ml) 2000ug/ml
B 300ul 300ul(從 A 管取) 1000ug/ml
C 300ul 300ul(從 B 管取) 500ug/ml
D 300ul 300ul(從 C 管取) 250ug/ml
E 300ul 300ul(從 D 管取) 125ug/ml
F 300ul 300ul(從 E 管取) 62.5ug/ml
G 300ul 300ul(從 F 管取) 31.25ug/ml
H 300ul 0ul                         0ug/ml（空白）
3、 將 25ul 的標準品和合適濃度范圍的樣本（比如 5ul 樣品+20ul 稀釋液）分別添加于 96 孔板的微孔中。
4、 各孔加入 200ul BCA 工作液，充分混勻。
5、 蓋上 96 孔板蓋，37℃孵育 30 分鐘（如果濃度較低，可適當提高孵育溫度或延長孵育時間） 。
6、 冷卻到室溫，用酶標儀測定 A562，根據標準曲線計算出蛋白濃度。